生長激素（GH）ELISA試劑盒的原理及操作步驟

　　生長激素(GH)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人生長激素(GH)的含量。
 

　　生長激素(GH)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理：
 

　　采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GH單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的GH與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人GH，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，最后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，GH濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中GH濃度。
 

　　生長激素(GH)ELISA試劑盒的操作步驟：
 

　　1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 

　　2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
 

　　3、樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
 

　　4、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 

　　5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
 

　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
 

　　7、每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。