人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法

一. 樣品收集、處理及保存方法：人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法

1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

二. 自備物品：

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.  37℃恒溫箱

三. 人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法實驗注意事項：

1） 充分混勻對保證反應結果很重要，在加液后請輕輕晃動整個96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產生。

4） 檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要，洗滌不充分會下降并導致結果誤差較大。

四. 檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被(ALT)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(ALT)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

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1） 服務項目：間接法ELISA檢測

內容說明：客戶提供檢測材料

結果周期：檢測試驗報告 1周

2） 服務項目：夾心法ELISA檢測

內容說明：客戶提供檢測材料

結果周期：檢測試驗報告 1周

3） 服務項目：競爭法ELISA檢測

內容說明：客戶提供檢測材料

結果周期：檢測試驗報告 1周

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